מבוא לגורמים המשפיעים על הרזולוציה של עמודה כרומטוגרפית

הגורמים המשפיעים על הרזולוציה של עמודה כרומטוגרפית הם סוג ותכונות השלב הנייח (גודל החלקיקים, התפלגות גודל החלקיקים וכו'), תנאי האריזה, אורך העמודה, סוג וקצב הזרימה של הפאזה הניידת, והמאפיינים של החומרים המשמשים למדידת יעילות העמודה. פרטים כדלקמן:

(1) האורך הכרומטוגרפי ותכונות חומר המילוי, ככל שהעמודה הכרומטוגרפית ארוכה יותר, כך הניתוח בין הרכיבים טוב יותר, אך ככל שהעמודה הכרומטוגרפית ארוכה יותר, כך גדלה ירידת הלחץ ולחץ הכניסה מוגבל. אם העמודה ארוכה מדי, יחס הלחץ של הכניסה והיציאה יגדל, מה שישפיע על הפרדת הפסגות הכרומטוגרפיות;

(2) גודל החלקיקים של אריזת העמודה הכרומטוגרפית הוא גם הגורם העיקרי. ככל שהחלקיקים עדינים יותר, כך הרזולוציה טובה יותר בשל הגידול בשטח הפנים, אך החלקיקים העדינים יותר יגדילו את ירידת הלחץ בעמוד, שתהיה גם השפעה שלילית;

(3) לטמפרטורת העמודה יש ​​השפעה רבה גם על ניתוח כרומטוגרף הנוזל, מכיוון שמסיסות הגז בנוזל או מידת הספיחה על פני השטח המוצקים יורדת עם עליית הטמפרטורה. בניתוח כרומטוגרפי נוזלי של גז -, כאשר הטמפרטורה עולה על טמפרטורה מסוימת, נוזלים סטטיים בדרך כלל מתאדים מהעמוד, ולכן יש לקחת בחשבון את נקודת הרתיחה של הדגימה בבחירת טמפרטורת העמוד. בדרך כלל, הוא מעט נמוך מהערך הממוצע של נקודת הרתיחה של המדגם;

(4) השפעת סוג הגז המוביל של כרומטוגרף הגז. גזי הנשא הנפוצים בשימוש הם N2, H2, He, Ar וכו'. ביניהם, המשקל המולקולרי של גז H2 ו-He קטן, מה שמסייע לשיפור מהירות הניתוח, אך קל ליצור דיפוזיה למדיום עם ריכוז גבוה יותר. בו, מה שמשפיע על מידת ההפרדה, ולכן במדידה בפועל גזים בינוניים H2 ו-He משמשים בדרך כלל באזורים עם ריכוז בינוני נמוך ומגדילים את קצב הזרימה שלהם כדי להפחית את השפעת הדיפוזיה. היתרונות של גזים בעלי משקלים מולקולריים גדולים יותר כמו N2 ו-Ar הם שהשפעת הדיפוזיה קטנה, והחיסרון הוא שמפל הלחץ בעמוד גדול וקצב הזרימה איטי, כלומר, תקופת הניתוח ארוכה;

(5) השפעת קצב זרימת הגז המוביל. זמן השהייה של המדיום על השלב הנייח תלוי בעיקר במאפייני המדיום עצמו (תנודתיות, קוטביות וכו') וקצב הזרימה של הגז המוביל. לכן, מהירות קצב הזרימה משפיעה ישירות על מידת ההפרדה;

(6) השפעת זמן ההזרקה ונפח ההזרקה. זמן ההזרקה צריך להיות קצר ככל האפשר. באופן עקרוני, הזרקה מיידית תשפר את הרזולוציה. נפח ההזרקה צריך להיות קטן ככל האפשר, אך צריך להיות מזוהה על ידי הגלאי.

לכן, ניתן להשיג את השיפור ברזולוציית העמודה הכרומטוגרפית על ידי הגדלת אורך העמודה, הפחתת נפח ההזרקה, הפחתת קצב זרימת הגז המוביל, הורדת טמפרטורת העמודה הכרומטוגרפית, הגדלת טמפרטורת תא האידוי והפחתת הנפח המת של המערכת.